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【医院文化】系列之七十四:“热效应(高压锅)在免疫组织化学中的应用”科研项目
“热效应(高压锅)在免疫组织化学中的应用”项目由我院王晋芬教授组织,与王全红、焦士兰、肖彦增共同完成。1995年该技术引进我院取得了非常满意的效果,并于1997年10月获我省科学技术进步二等奖。
石蜡包埋组织免疫组化染色是临床病理诊断的重要手段之一,由于常规组织处理过程造成的抗原封闭与结构改变使一些原体不能用于石蜡切片或反映微弱,我们应用热介导抗原恢复效应引起蛋白溶解和蛋白四级结构改变的原理,对组织切片在高压锅内进行热处理,使原来只用于冰冻切片的某些抗体现可用于石蜡切片,扩大了抗体的使用范围,提高了免疫组化在诊断中的应用价值。增强了免疫染色的敏感性,抗体稀释度增加了3—20倍,从社会效益方面有助于疑难肿瘤的诊断,使患者得到适应的诊治。
项目选用我院病理科石蜡包埋的一组疑难肿瘤112例,选用35种抗体,为防止煮沸过程中脱片,先将载玻片进行预处理。将组织切片常规脱蜡水化,然后将组织切片放在含0.2%柠檬酸缓冲液的高压锅内,在15tb下煮沸2分钟,冷却后将切片移至PBS缓冲液中,对Kappa、Lambda分四组进行处理,一组高压下煮沸2分钟,第二组胰蛋白酶消化10分钟,第三组先经胰蛋白酶消化5分钟后在高压下煮沸2分钟,最后一组不做任何处理。经热处理后原来只作用于冰冻切片的抗体现可作用于石蜡切片,热处理后组织对抗体的敏感性明显增强,在低浓度下仍然反应良好,且背景清晰。
甲醛固定和石蜡包埋所造成的组织抗原性封闭,使一些抗体的应用受限,胰蛋白酶消化应用已久,但有时会破坏组织形态。我们使用高压锅与微波炉相比廉价、省时、染色质量高,染色得复性好,不易脱片,可用于大量的切片的处理,是一种值得在免疫组化染色中推广的好方法。
该项#在我国为#应用,它提高了在临床病理诊断中的应用价值,同时对疑难病理的诊断也提高了其确诊率,具有科学性、先进性和实用性。